什么是居住权？
《民法典》出来了，最近讨论的人多了起来，说说自己的观点。
一，居住权是用益物权，是他物权，是物权
大家常说的”这个房子是我买的，我当然有居住权” ”这个房子是我父母的，我当然有居住权”中的居住权并非物权概念的居住权，只是基于所有权而依法享有的占有、使用、收益和处分的权利，一旦所有权丧失，那么居住（使用）的权利也随之丧失。比如说你把房子卖了，你当然地就不能继续居住了，除非买受人同意。
大家常说的”这个房子是我租的，我当然有居住权”中的居住权也非物权概念的居住权，而是基于租赁合同关系产生的占有，而所有的居住（使用）权利，一旦租赁合同解除或者终止，那么居住（使用）的权利也随之丧失。比如租赁的房子到期了，不续租，租客不能赖着不搬。出租人与承租人的关系是债权债务关系。
二、居住权与所有权变动的关系
所有权变动，居住权不变动，也不随之丧失。就像“买卖不破租赁”，当然地“买卖不破居住权”。
房屋所有权人转让房屋的，居住权不丧失。
当债务人不能偿还到期债务，抵押权人（银行）行使抵押权的时候，房屋被拍卖，抵押人（房屋所有权人）丧失了所有权，同时丧失了居住的权利。
当债务人不能偿还到期债务，债权人申请执行债务人的房屋，被拍卖后，债务人丧失了房屋的所有权，同时丧失了居住的权利。如果房屋给第三人设立了居住权，即便被拍卖，居住权人的居住权不丧失。
三，居住权以“登记”为生效要件
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不动产物权的变动以登记为生效要件。比如，你把房子卖给我，只有去房地产交易中心办理过户登记之后拿的新的产证，才可以非常有底气的说是我的房子。同理你的房子如果要给谁居住权，那登记是必要条件。经依法登记，方能发生效力，未经登记不发生物权变动的效力，居住权自登记时设立。你的租客不会在你未同意的情况下获得居住权。想的美
四，居住权可以有期限，可以附条件，不得转让、继承
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可以只设定十年，也可以设置二十年，只要意思表示真实即可，还可以设立终身的居住权。
居住权可以附条件。居住权一经设立即发生物权效力，那么居住权人侵害所有权人，所有权人如何救济呢？可以在合同上约定相关事项，如居住权人滥用居住权，居住权人违背合同主要义务，根本性违约等，居住权终止。
居住权不得转让、继承。居住权不得转让，因此，居住权本身不能抵押。
设立居住权的房屋不得出租，有约定从约定。
五，不动产设立了居住权的后果
房屋一旦设立居住权，那么在居住权设立期内，所有权转让，居住权仍然有效。也就是说这个房子买受人只有在居住权期间届满才能住进去，所以大家可以想象买的人就很少了，谁买房不是为了马上能住进去，谁乐意等个十年二十年的。那么这样的房屋在转让的时候价格必然会很低。如果设立居住权的房子很多，市场有效房源就会减少。
六，居住权和抵押权的关系
居住权是用益物权，抵押权是担保物权。两者冲突如何解决，《民法典》没有明确。
根据《民法典》第四百零五条 抵押权设立前，抵押财产已经出租并转移占有的，原租赁关系不受该抵押权的影响。根据这个原则，抵押权设立前，已经设立居住权的，不受抵押权影响。
根据物权的排他性，一物之上同时设立两个他物权，一种情况是不能并存，另一种情况是可以并存。
不能并存的情况下：为优的物权存续，为劣的物权消灭；
可以并存的情况下：为劣的物权在不影响为优的物权的情况下，可以存续，比如两个抵押权同时存在，登记在先的为优。
目前来说，居住权和抵押权谁优谁劣没有明确，但是从交易安全的角度来说，设立在先的他物权优于设立在后的他物权。
抵押权设立在先。我们知道一旦设立居住权，房屋的价值就会降低，且会严重影响抵押权的实现，按照《民法典》四百零八条抵押人的行为足以使抵押财产价值减少的，抵押权人有权请求抵押人停止其行为；抵押财产价值减少的，抵押权人有权请求恢复抵押财产的价值，或者提供与减少的价值相应的担保。抵押人不恢复抵押财产的价值，也不提供担保的，抵押权人有权请求债务人提前清偿债务。所以一般情况下按揭的房屋要设立居住权大体上是需要抵押权人即银行同意，有约定的除外。
居住权设立在先。一旦设立居住权，那么该房屋在居住权设立期内基本上很难转让。因此银行会综合确定一个标准，比如超过5年的居住权的房屋不予抵押，亦或根据债务人的偿债能力评估确定年限，就好比30年房龄的房子银行是不愿意抵押的。
很简单的道理，银行一般都不接受房屋二次抵押，更何况房屋设立了居住权。
七，居住权的数量限制
一套住房可以设立几个居住权，多少居住权人，《民法典》没有明确。
根据前述一物之上设立多个他物权的情况，无论设立了多少个居住权，最先登记的居住权总是优先的。同一个时间点有两个居住权人，顺序第一的优先。等到第一个居住权期间届满或者第一个居住权人死亡，顺序第二的居住权人才可以住进去。当然如果按照时间段分别设立居住权，这并不冲突。
八，债权人的撤销权
《民法典》五百三十八条 债务人以放弃其债权、放弃债权担保、无偿转让财产等方式无偿处分财产权益，或者恶意延长其到期债权的履行期限，影响债权人的债权实现的，债权人可以请求人民法院撤销债务人的行为。
根据《民法典》五百三十八条 撤销权自债权人知道或者应当知道撤销事由之日起一年内行使。自债务人的行为发生之日起五年内没有行使撤销权的，该撤销权消灭。
债务人想着给家里人设立居住权以逃避债务，债权人可以行使撤销权。一旦撤销权丧失，那债权人只能望房兴叹了，老赖照样可以住别墅哦。
不过这也产生了一个新的问题，以后要借钱给别人，不能光知道他有房子，说不定他这个房子都设立了居住权，到时候他做老赖你也没办法拍卖他的房子。
《民法典》出来了，最近讨论的人多了起来，说说自己的观点。
一，居住权是用益物权，是他物权，是物权
大家常说的”这个房子是我买的，我当然有居住权” ”这个房子是我父母的，我当然有居住权”中的居住权并非物权概念的居住权，只是基于所有权而依法享有的占有、使用、收益和处分的权利，一旦所有权丧失，那么居住（使用）的权利也随之丧失。比如说你把房子卖了，你当然地就不能继续居住了，除非买受人同意。
大家常说的”这个房子是我租的，我当然有居住权”中的居住权也非物权概念的居住权，而是基于租赁合同关系产生的占有，而所有的居住（使用）权利，一旦租赁合同解除或者终止，那么居住（使用）的权利也随之丧失。比如租赁的房子到期了，不续租，租客不能赖着不搬。出租人与承租人的关系是债权债务关系。
二、居住权与所有权变动的关系
所有权变动，居住权不变动，也不随之丧失。就像“买卖不破租赁”，当然地“买卖不破居住权”。
房屋所有权人转让房屋的，居住权不丧失。
当债务人不能偿还到期债务，抵押权人（银行）行使抵押权的时候，房屋被拍卖，抵押人（房屋所有权人）丧失了所有权，同时丧失了居住的权利。
当债务人不能偿还到期债务，债权人申请执行债务人的房屋，被拍卖后，债务人丧失了房屋的所有权，同时丧失了居住的权利。如果房屋给第三人设立了居住权，即便被拍卖，居住权人的居住权不丧失。
三，居住权以“登记”为生效要件
图片
不动产物权的变动以登记为生效要件。比如，你把房子卖给我，只有去房地产交易中心办理过户登记之后拿的新的产证，才可以非常有底气的说是我的房子。同理你的房子如果要给谁居住权，那登记是必要条件。经依法登记，方能发生效力，未经登记不发生物权变动的效力，居住权自登记时设立。你的租客不会在你未同意的情况下获得居住权。想的美
四，居住权可以有期限，可以附条件，不得转让、继承
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可以只设定十年，也可以设置二十年，只要意思表示真实即可，还可以设立终身的居住权。
居住权可以附条件。居住权一经设立即发生物权效力，那么居住权人侵害所有权人，所有权人如何救济呢？可以在合同上约定相关事项，如居住权人滥用居住权，居住权人违背合同主要义务，根本性违约等，居住权终止。
居住权不得转让、继承。居住权不得转让，因此，居住权本身不能抵押。
设立居住权的房屋不得出租，有约定从约定。
五，不动产设立了居住权的后果
房屋一旦设立居住权，那么在居住权设立期内，所有权转让，居住权仍然有效。也就是说这个房子买受人只有在居住权期间届满才能住进去，所以大家可以想象买的人就很少了，谁买房不是为了马上能住进去，谁乐意等个十年二十年的。那么这样的房屋在转让的时候价格必然会很低。如果设立居住权的房子很多，市场有效房源就会减少。
六，居住权和抵押权的关系
居住权是用益物权，抵押权是担保物权。两者冲突如何解决，《民法典》没有明确。
根据《民法典》第四百零五条 抵押权设立前，抵押财产已经出租并转移占有的，原租赁关系不受该抵押权的影响。根据这个原则，抵押权设立前，已经设立居住权的，不受抵押权影响。
根据物权的排他性，一物之上同时设立两个他物权，一种情况是不能并存，另一种情况是可以并存。
不能并存的情况下：为优的物权存续，为劣的物权消灭；
可以并存的情况下：为劣的物权在不影响为优的物权的情况下，可以存续，比如两个抵押权同时存在，登记在先的为优。
目前来说，居住权和抵押权谁优谁劣没有明确，但是从交易安全的角度来说，设立在先的他物权优于设立在后的他物权。
抵押权设立在先。我们知道一旦设立居住权，房屋的价值就会降低，且会严重影响抵押权的实现，按照《民法典》四百零八条抵押人的行为足以使抵押财产价值减少的，抵押权人有权请求抵押人停止其行为；抵押财产价值减少的，抵押权人有权请求恢复抵押财产的价值，或者提供与减少的价值相应的担保。抵押人不恢复抵押财产的价值，也不提供担保的，抵押权人有权请求债务人提前清偿债务。所以一般情况下按揭的房屋要设立居住权大体上是需要抵押权人即银行同意，有约定的除外。
居住权设立在先。一旦设立居住权，那么该房屋在居住权设立期内基本上很难转让。因此银行会综合确定一个标准，比如超过5年的居住权的房屋不予抵押，亦或根据债务人的偿债能力评估确定年限，就好比30年房龄的房子银行是不愿意抵押的。
很简单的道理，银行一般都不接受房屋二次抵押，更何况房屋设立了居住权。
七，居住权的数量限制
一套住房可以设立几个居住权，多少居住权人，《民法典》没有明确。
根据前述一物之上设立多个他物权的情况，无论设立了多少个居住权，最先登记的居住权总是优先的。同一个时间点有两个居住权人，顺序第一的优先。等到第一个居住权期间届满或者第一个居住权人死亡，顺序第二的居住权人才可以住进去。当然如果按照时间段分别设立居住权，这并不冲突。
八，债权人的撤销权
《民法典》五百三十八条 债务人以放弃其债权、放弃债权担保、无偿转让财产等方式无偿处分财产权益，或者恶意延长其到期债权的履行期限，影响债权人的债权实现的，债权人可以请求人民法院撤销债务人的行为。
根据《民法典》五百三十八条 撤销权自债权人知道或者应当知道撤销事由之日起一年内行使。自债务人的行为发生之日起五年内没有行使撤销权的，该撤销权消灭。
债务人想着给家里人设立居住权以逃避债务，债权人可以行使撤销权。一旦撤销权丧失，那债权人只能望房兴叹了，老赖照样可以住别墅哦。
不过这也产生了一个新的问题，以后要借钱给别人，不能光知道他有房子，说不定他这个房子都设立了居住权，到时候他做老赖你也没办法拍卖他的房子。
https://t.cn/z8m88mF 我的评分：[星星][星星][星星][星星][半星]
[咖啡]“We have a reasonable doubt and that is something that very valuable in our system.”
我们提出合理的怀疑，这是我们司法制度中非常宝贵的东西。
1️⃣心路历程：一开始看这部电影纯纯因为英专大怨种的表演作业，了解了一下电影的成就开始有点感兴趣，看完以后我只想强推，个人认为除开法学生和英专生的友子们看看也是很有益的。
总体评价：
2️⃣先来点直观感受：
黑白电影，场景单一，主要场景只有陪审团休息室，靠房间里仅有的物件和窗外的天气就能将氛围表达出来；
人物刻画饱满，体现在各人物身份不同、性格各异，围绕一起贫民窟男孩涉嫌杀害自己亲生父亲的案件展开了多个角度的思考；
主题明确，在电影中直接提出思考问题：民主社会中的陪审团制度意义何在？人们应如何行使自己的权利？
演员演技台词很带感，每个不同人物在不同阶段的情绪都诠释得很到位，剧本的安排也十分巧妙，可以看出许多前后呼应对比。
故事题材：
3️⃣电影是一个not guilt与 guilty的辩论过程。十二名陪审员必须对案件达成一致看法才允许离开房间，然而第一次投票时却有一人投了与众人相反的票，一场大戏由此展开。不同的背景让他们之间的交流艰难却有趣，也让最终结果难以猜测。如果辩题是别的话题，那这几小时的讨论也许会看起来像是一场抬杠，但正是它的特殊性—关乎人命、关乎司法，让结果不能有一点私心的成分。同样，如果是其他的选择，一般情况下遵从少数服从多数的原则，但这是一个人的生命，不能有一个错位的选项。这里要表达的民主或许就是：让尽量足够多的不同阶层、职业、性格的人都能自由地表达自己的看法，而这种“足够多”能在最大程度上维持公平。
4️⃣对陪审团的看法：其实主角的选择不一定正确，但经过了不同人的反对、讨论，得到了最终认可。这到底算不算公平？制度的出发点是好的，但我觉得局限性也很大：没有人能保证陪审员中会有人像男主那般重视公正，抓住细节而不放，如果大多数人和那位赶着去看球赛的人一样事不关己高高挂起呢？每个人都有提出怀疑的权利，但是是否每个人都会履行这个权利？是否会尽到陪审员的义务呢？电影最后没有指出主角的选择是否正确，留给下了思考的空间。
#电影 ##十二怒汉 ##小红书精选#
[咖啡]“We have a reasonable doubt and that is something that very valuable in our system.”
我们提出合理的怀疑，这是我们司法制度中非常宝贵的东西。
1️⃣心路历程：一开始看这部电影纯纯因为英专大怨种的表演作业，了解了一下电影的成就开始有点感兴趣，看完以后我只想强推，个人认为除开法学生和英专生的友子们看看也是很有益的。
总体评价：
2️⃣先来点直观感受：
黑白电影，场景单一，主要场景只有陪审团休息室，靠房间里仅有的物件和窗外的天气就能将氛围表达出来；
人物刻画饱满，体现在各人物身份不同、性格各异，围绕一起贫民窟男孩涉嫌杀害自己亲生父亲的案件展开了多个角度的思考；
主题明确，在电影中直接提出思考问题：民主社会中的陪审团制度意义何在？人们应如何行使自己的权利？
演员演技台词很带感，每个不同人物在不同阶段的情绪都诠释得很到位，剧本的安排也十分巧妙，可以看出许多前后呼应对比。
故事题材：
3️⃣电影是一个not guilt与 guilty的辩论过程。十二名陪审员必须对案件达成一致看法才允许离开房间，然而第一次投票时却有一人投了与众人相反的票，一场大戏由此展开。不同的背景让他们之间的交流艰难却有趣，也让最终结果难以猜测。如果辩题是别的话题，那这几小时的讨论也许会看起来像是一场抬杠，但正是它的特殊性—关乎人命、关乎司法，让结果不能有一点私心的成分。同样，如果是其他的选择，一般情况下遵从少数服从多数的原则，但这是一个人的生命，不能有一个错位的选项。这里要表达的民主或许就是：让尽量足够多的不同阶层、职业、性格的人都能自由地表达自己的看法，而这种“足够多”能在最大程度上维持公平。
4️⃣对陪审团的看法：其实主角的选择不一定正确，但经过了不同人的反对、讨论，得到了最终认可。这到底算不算公平？制度的出发点是好的，但我觉得局限性也很大：没有人能保证陪审员中会有人像男主那般重视公正，抓住细节而不放，如果大多数人和那位赶着去看球赛的人一样事不关己高高挂起呢？每个人都有提出怀疑的权利，但是是否每个人都会履行这个权利？是否会尽到陪审员的义务呢？电影最后没有指出主角的选择是否正确，留给下了思考的空间。
#电影 ##十二怒汉 ##小红书精选#
【揭开埃博拉病毒“复制机器”的面纱】今年9月，非洲乌干达再次出现新的埃博拉疫情。这意味着埃博拉病毒这把“达摩克利斯之剑”依然悬在头顶，时刻威胁着人们的健康。
科学界一直想研制一款成本低、有利于推广的广谱性抗埃博拉病毒小分子药物，但却缺乏理论指导。埃博拉病毒聚合酶负责病毒基因组复制过程，且具有较高保守性，是研发广谱性药物的重要靶标。但埃博拉病毒聚合酶的分子量大、不稳定、易降解，其三维结构的解析一直是世界性难题。
现在，中国科学院微生物所高福院士团队和施一团队合作，首次解析了埃博拉病毒聚合酶复合物的三维结构，为从分子水平理解埃博拉病毒复制机制奠定了关键理论基础。他们还解析了老药苏拉明能有效抑制埃博拉病毒聚合酶活性的分子机制，为抗埃博拉病毒的药物开发提供了新的靶点和方向。相关研究9月28日发表于《自然》杂志。
现形：结构稳定的“复制机器”
埃博拉病毒病是由埃博拉病毒引起的烈性急性传染病，主要在人或灵长目动物之间传播。自1976年首次在非洲扎伊尔和苏丹被发现后，埃博拉病毒已在非洲肆虐了近50年，暴发过30多次，造成数万人死亡，病死率最高可达90%。
其中，2014-2016年暴发于西非国家的埃博拉疫情，是有史以来最严重的一次，共导致约2.9万人感染，超过1.1万人死亡。2018至2020年暴发于刚果民主共和国的埃博拉疫情也导致3481人感染，2299人死亡。2021年在西非国家几内亚再次发现埃博拉病毒活跃迹象，提示病毒可能存在潜伏感染。
这些数据说明，对埃博拉病毒仍需加强科学研究。
目前，已有两款上市的扎伊尔型埃博拉病毒抗体药物，其作用靶点是埃博拉病毒表面刺突糖蛋白（GP）。
“已上市的抗体药物具有特异性，不能用于治疗其他类型埃博拉病毒以及马尔堡病毒等丝状病毒。此外，病毒表面的GP蛋白在宿主免疫压力下也容易发生免疫逃逸，有可能造成抗体药物效果变差甚至无效。”论文通讯作者施一对《中国科学报》说。
此外，他表示，由于抗体药物制造成本比较高，需要低温储存，不利于在非洲地区普及推广使用。开发有效安全的广谱性抗病毒小分子药物是应对不同类型埃博拉病毒和其他丝状病毒感染的重要研究方向。
科学家已经发现，埃博拉病毒基因组的转录与复制过程由病毒聚合酶蛋白L和其他辅助蛋白形成的复合物来共同完成。由于聚合酶复合物在不同的丝状病毒中具有高度保守性，是非常理想的广谱性抗病毒药物开发靶点。
此前的研究还发现瑞德西韦和法比拉韦，这两个针对埃博拉病毒聚合酶的核苷类小分子药物具有良好的体外抗病毒活性。然而，其临床效果却并不理想。目前，临床上尚未有批准可用于治疗埃博拉病毒感染的小分子药物。
那么，现有的靶向聚合酶药物如何进行结构优化？能否针对聚合酶保守位点开发新的药物来治疗埃博拉病毒病？
回答这些问题，迫切要求研究人员弄清楚埃博拉病毒的复制机制。
埃博拉病毒属于丝状病毒科，基因组为不分节段的负链RNA，长约19 kb，包含7个开放阅读框。过去近10年，科学家对这种病毒的复杂结构已经有了一些了解，比如它的RNA基因组被核蛋白（NP）包裹，形成核糖核蛋白复合体（RNP），进一步与聚合酶蛋白（L）、病毒辅助蛋白（VP35）、转录激活蛋白（VP30）和核衣壳相关蛋白（VP24）结合，形成螺旋状核衣壳结构，并被基质蛋白（VP40）环绕，进一步与病毒表面GP蛋白形成完整病毒颗粒。
解析埃博拉病毒聚合酶的三维结构却是全球病毒学家面临的一个挑战。经过多年的尝试摸索，施一与高福合作研究团队成功表达纯化获得了埃博拉病毒聚合酶复合物蛋白（L-VP35复合物），并利用冷冻电镜技术解析其高分辨率三维结构。他们发现，埃博拉病毒的聚合酶L蛋白会与VP35蛋白四聚体形成稳定的复合物，进行病毒基因组复制和转录。
那么，L-VP35聚合酶复合物如何介导这一功能呢？研究团队在原子层面对这个问题进行了深入探索。
入微：揭开“共舞”机制
通过深入观察，研究团队对聚合酶复合物的动态构象变化有了微观水平的了解。
作为病毒“复制机器”的核心，聚合酶在生成子代RNA的过程中涉及到多种构象变化，从而促进产物顺利合成，其中最重要的构象变化是从起始态到延伸态的转变。
此前的研究表明，聚合酶从起始状态进入到延伸状态时，酶活中心的两个关键结构元件——启动环（priming loop）和支撑螺旋（supporting helix）必须发生巨大的构象调整，才能保证产物链有足够的空间进行延伸。否则，就会与产物链发生空间位阻。
研究者通过改变冷冻电镜的制样条件，捕捉到了埃博拉病毒聚合酶处于延伸状态时的精细结构。他们发现，在处于延伸构象时，启动环完全缩回到加帽结构域，而支撑螺旋也会远离聚合酶的活性中心，从而为模板/产物双链RNA提供足够的空间进行延伸。
那么，病毒VP35蛋白如何与L聚合酶“共舞”呢？
研究发现，在病毒复制过程中，VP35会像“桥梁”一样，起到连接L蛋白和病毒RNP的功能。“当L聚合酶进行病毒基因组复制时，是以螺旋形的RNP为模板，而不是以裸露的RNA为模板，这时VP35主要行使的是分子伴侣功能，介导L聚合酶以RNP为单元进行复制。”施一说。
他向《中国科学报》解释，VP35四聚体除了中间的寡聚化结构域，两头分别有四个N端（氨基端）结构域和四个C端（羧基端）结构域，其中一个C端结合到L蛋白上，进一步稳定L聚合酶与VP35四聚体的结合，同时另外七个端会像“八爪鱼的触角”一样，帮助L聚合酶在RNP结构上发生滑动，以及结合单体状态下的病毒RNP蛋白，阻止其与宿主RNA发生非特异性相互作用，保证单体NP蛋白能够用于子代RNP的生成。
“如果没有VP35，L聚合酶蛋白就没法进行基因组复制和转录过程。”施一表示，如果能够阻断L蛋白和VP35的结合，病毒将无法复制。
洞见：指导药物设计与优化
开发能有效抑制埃博拉病毒的小分子药物一直是国际热点，也是难点。
施一表示，了解L-VP35复合物相互作用界面的分子细节，为进一步开发靶向聚合酶的药物提供了新的靶点以及重要指导信息。
据介绍，埃博拉病毒聚合酶活性结构域和加帽结构域与呼吸道合胞病毒（RSV）和狂犬病毒（RABV）等其他（基因组）不分节段的负链RNA病毒聚合酶结构相似，说明这类病毒聚合酶在进化过程中具有保守性。
值得注意的是，研究者指出，埃博拉病毒聚合酶的N端结构域区域具有一个丝状病毒特有的插入结构域，并在埃博拉病毒聚合酶发挥活性时是必不可少的，可成为潜在的抗病毒药物研发靶点。
此次研究中，研究团队还对百年老药苏拉明体外抗埃博拉病毒活性的分子机制进行了探索。
苏拉明是20世纪初由德国化学家保罗·埃利希首次分离出来的一种无嗅、无味的白色粉末，可溶于生理盐水中，后来被发现可用于治疗多种寄生虫病，从20世纪20年代初被广泛用于治疗非洲昏睡病和盘尾丝虫病等寄生虫病。近年来，科学家发现苏拉明具有抗新冠以及癌症活性。前期初步研究提示苏拉明也具有抗埃博拉病毒活性，但其作用机制不甚清楚。
研究人员通过体外酶活和细胞复制子实验，发现苏拉明能有效地抑制埃博拉病毒聚合酶活性，并进一步利用冷冻电镜技术解析了埃博拉病毒聚合酶与苏拉明的复合物结构，揭示苏拉明是通过结合在聚合酶的NTP进入通道，阻碍底物进入酶活中心而发挥抑制作用。苏拉明药物与L蛋白相互作用的分子细节，为进一步改造和优化苏拉明药物提供了关键参考信息。
“苏拉明是一种潜在的抗病毒药物，这项研究的一个亮点是解析L蛋白与苏拉明的复合物，这可以指导进一步的抗病毒药物设计。”该论文一位审稿人说。另一位同行评审人则表示，埃博拉病毒L蛋白结构信息的缺乏一直是该领域公认的空白，这项研究提供了重要的信息，有助于促进基于结构的抗病毒药物设计。https://t.cn/A6o7Cgr9
科学界一直想研制一款成本低、有利于推广的广谱性抗埃博拉病毒小分子药物，但却缺乏理论指导。埃博拉病毒聚合酶负责病毒基因组复制过程，且具有较高保守性，是研发广谱性药物的重要靶标。但埃博拉病毒聚合酶的分子量大、不稳定、易降解，其三维结构的解析一直是世界性难题。
现在，中国科学院微生物所高福院士团队和施一团队合作，首次解析了埃博拉病毒聚合酶复合物的三维结构，为从分子水平理解埃博拉病毒复制机制奠定了关键理论基础。他们还解析了老药苏拉明能有效抑制埃博拉病毒聚合酶活性的分子机制，为抗埃博拉病毒的药物开发提供了新的靶点和方向。相关研究9月28日发表于《自然》杂志。
现形：结构稳定的“复制机器”
埃博拉病毒病是由埃博拉病毒引起的烈性急性传染病，主要在人或灵长目动物之间传播。自1976年首次在非洲扎伊尔和苏丹被发现后，埃博拉病毒已在非洲肆虐了近50年，暴发过30多次，造成数万人死亡，病死率最高可达90%。
其中，2014-2016年暴发于西非国家的埃博拉疫情，是有史以来最严重的一次，共导致约2.9万人感染，超过1.1万人死亡。2018至2020年暴发于刚果民主共和国的埃博拉疫情也导致3481人感染，2299人死亡。2021年在西非国家几内亚再次发现埃博拉病毒活跃迹象，提示病毒可能存在潜伏感染。
这些数据说明，对埃博拉病毒仍需加强科学研究。
目前，已有两款上市的扎伊尔型埃博拉病毒抗体药物，其作用靶点是埃博拉病毒表面刺突糖蛋白（GP）。
“已上市的抗体药物具有特异性，不能用于治疗其他类型埃博拉病毒以及马尔堡病毒等丝状病毒。此外，病毒表面的GP蛋白在宿主免疫压力下也容易发生免疫逃逸，有可能造成抗体药物效果变差甚至无效。”论文通讯作者施一对《中国科学报》说。
此外，他表示，由于抗体药物制造成本比较高，需要低温储存，不利于在非洲地区普及推广使用。开发有效安全的广谱性抗病毒小分子药物是应对不同类型埃博拉病毒和其他丝状病毒感染的重要研究方向。
科学家已经发现，埃博拉病毒基因组的转录与复制过程由病毒聚合酶蛋白L和其他辅助蛋白形成的复合物来共同完成。由于聚合酶复合物在不同的丝状病毒中具有高度保守性，是非常理想的广谱性抗病毒药物开发靶点。
此前的研究还发现瑞德西韦和法比拉韦，这两个针对埃博拉病毒聚合酶的核苷类小分子药物具有良好的体外抗病毒活性。然而，其临床效果却并不理想。目前，临床上尚未有批准可用于治疗埃博拉病毒感染的小分子药物。
那么，现有的靶向聚合酶药物如何进行结构优化？能否针对聚合酶保守位点开发新的药物来治疗埃博拉病毒病？
回答这些问题，迫切要求研究人员弄清楚埃博拉病毒的复制机制。
埃博拉病毒属于丝状病毒科，基因组为不分节段的负链RNA，长约19 kb，包含7个开放阅读框。过去近10年，科学家对这种病毒的复杂结构已经有了一些了解，比如它的RNA基因组被核蛋白（NP）包裹，形成核糖核蛋白复合体（RNP），进一步与聚合酶蛋白（L）、病毒辅助蛋白（VP35）、转录激活蛋白（VP30）和核衣壳相关蛋白（VP24）结合，形成螺旋状核衣壳结构，并被基质蛋白（VP40）环绕，进一步与病毒表面GP蛋白形成完整病毒颗粒。
解析埃博拉病毒聚合酶的三维结构却是全球病毒学家面临的一个挑战。经过多年的尝试摸索，施一与高福合作研究团队成功表达纯化获得了埃博拉病毒聚合酶复合物蛋白（L-VP35复合物），并利用冷冻电镜技术解析其高分辨率三维结构。他们发现，埃博拉病毒的聚合酶L蛋白会与VP35蛋白四聚体形成稳定的复合物，进行病毒基因组复制和转录。
那么，L-VP35聚合酶复合物如何介导这一功能呢？研究团队在原子层面对这个问题进行了深入探索。
入微：揭开“共舞”机制
通过深入观察，研究团队对聚合酶复合物的动态构象变化有了微观水平的了解。
作为病毒“复制机器”的核心，聚合酶在生成子代RNA的过程中涉及到多种构象变化，从而促进产物顺利合成，其中最重要的构象变化是从起始态到延伸态的转变。
此前的研究表明，聚合酶从起始状态进入到延伸状态时，酶活中心的两个关键结构元件——启动环（priming loop）和支撑螺旋（supporting helix）必须发生巨大的构象调整，才能保证产物链有足够的空间进行延伸。否则，就会与产物链发生空间位阻。
研究者通过改变冷冻电镜的制样条件，捕捉到了埃博拉病毒聚合酶处于延伸状态时的精细结构。他们发现，在处于延伸构象时，启动环完全缩回到加帽结构域，而支撑螺旋也会远离聚合酶的活性中心，从而为模板/产物双链RNA提供足够的空间进行延伸。
那么，病毒VP35蛋白如何与L聚合酶“共舞”呢？
研究发现，在病毒复制过程中，VP35会像“桥梁”一样，起到连接L蛋白和病毒RNP的功能。“当L聚合酶进行病毒基因组复制时，是以螺旋形的RNP为模板，而不是以裸露的RNA为模板，这时VP35主要行使的是分子伴侣功能，介导L聚合酶以RNP为单元进行复制。”施一说。
他向《中国科学报》解释，VP35四聚体除了中间的寡聚化结构域，两头分别有四个N端（氨基端）结构域和四个C端（羧基端）结构域，其中一个C端结合到L蛋白上，进一步稳定L聚合酶与VP35四聚体的结合，同时另外七个端会像“八爪鱼的触角”一样，帮助L聚合酶在RNP结构上发生滑动，以及结合单体状态下的病毒RNP蛋白，阻止其与宿主RNA发生非特异性相互作用，保证单体NP蛋白能够用于子代RNP的生成。
“如果没有VP35，L聚合酶蛋白就没法进行基因组复制和转录过程。”施一表示，如果能够阻断L蛋白和VP35的结合，病毒将无法复制。
洞见：指导药物设计与优化
开发能有效抑制埃博拉病毒的小分子药物一直是国际热点，也是难点。
施一表示，了解L-VP35复合物相互作用界面的分子细节，为进一步开发靶向聚合酶的药物提供了新的靶点以及重要指导信息。
据介绍，埃博拉病毒聚合酶活性结构域和加帽结构域与呼吸道合胞病毒（RSV）和狂犬病毒（RABV）等其他（基因组）不分节段的负链RNA病毒聚合酶结构相似，说明这类病毒聚合酶在进化过程中具有保守性。
值得注意的是，研究者指出，埃博拉病毒聚合酶的N端结构域区域具有一个丝状病毒特有的插入结构域，并在埃博拉病毒聚合酶发挥活性时是必不可少的，可成为潜在的抗病毒药物研发靶点。
此次研究中，研究团队还对百年老药苏拉明体外抗埃博拉病毒活性的分子机制进行了探索。
苏拉明是20世纪初由德国化学家保罗·埃利希首次分离出来的一种无嗅、无味的白色粉末，可溶于生理盐水中，后来被发现可用于治疗多种寄生虫病，从20世纪20年代初被广泛用于治疗非洲昏睡病和盘尾丝虫病等寄生虫病。近年来，科学家发现苏拉明具有抗新冠以及癌症活性。前期初步研究提示苏拉明也具有抗埃博拉病毒活性，但其作用机制不甚清楚。
研究人员通过体外酶活和细胞复制子实验，发现苏拉明能有效地抑制埃博拉病毒聚合酶活性，并进一步利用冷冻电镜技术解析了埃博拉病毒聚合酶与苏拉明的复合物结构，揭示苏拉明是通过结合在聚合酶的NTP进入通道，阻碍底物进入酶活中心而发挥抑制作用。苏拉明药物与L蛋白相互作用的分子细节，为进一步改造和优化苏拉明药物提供了关键参考信息。
“苏拉明是一种潜在的抗病毒药物，这项研究的一个亮点是解析L蛋白与苏拉明的复合物，这可以指导进一步的抗病毒药物设计。”该论文一位审稿人说。另一位同行评审人则表示，埃博拉病毒L蛋白结构信息的缺乏一直是该领域公认的空白，这项研究提供了重要的信息，有助于促进基于结构的抗病毒药物设计。https://t.cn/A6o7Cgr9
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