活物的话，又有皱纹，那就是老了。

——宫泽贤治《鹿舞起源》
日本的童话很轻盈，像羽毛。这本《日本的童话》，我最喜欢的是《喜欢孩子的神明》《花木村和盗贼们》，作者是新美南吉。《小岛的黄昏》很像蒲松龄的《聊斋志异》，作者是小川未明。还有宫泽贤治的《客堂童子的故事》和《鹿舞起源》。白描似的童心，不做作，很真诚，也不说教，是那种看一眼就能体会的感觉。 https://t.cn/R2Wx94B

Leadmium green AM 是一种特异性荧光探针，能够以高灵敏度特异性测量细胞内铅和镉水平。专为检测活细胞中的这些有毒环境污染物而设计。

产品特点：
※ 用于细胞内铅和镉含量测量的高度特异性指示剂
※ 允许用于多种检测方式—流式细胞分析、荧光显微镜成像以及微孔板读数仪
※ 可检测出纳摩尔水平的铅和微摩尔水平的镉
※ 采用 488 nm 激光线激发
※ 易于加载，在酯酶切割乙酰氧基甲基基团后能很好地保留在细胞内。

试剂准备
1 从冰箱内取出一管Leadmium Green AM （50 µg），回温到室温，避光保存。
2 加入50µl 高质量无水的DMSO，避光混匀，使其充分溶解。
3 用生理盐水按照1：10的比例将Leadmium Green AM 的DMSO储存液稀释成工作液，所有溶液制备过程一直避光。
4 37℃温育生理盐水，用于后续步骤的清洗。
5 如需要设置对照（用PbCl2处理细胞），建议PbCl2的起始浓度范围是1nM-625nM。制备625nM PbCl2【添加250µl 10µM PbCl2到3.75ml生理盐水。做9次连续性梯度稀释最终得到1nM PbCl2】。37℃保存这些溶液。每个浓度需要1ml量。
6 如需要设置对照（用CdCl2处理细胞），建议CdCl2的起始浓度范围是1µM-250µM。制备250µM CdCl2【添加1ml 1mM CdCl2到3ml生理盐水。做8次连续性梯度稀释最终得到1µM CdCl2】。37℃保存这些溶液。每个浓度需要1ml量。
7 【可选】制备10mM TPEN工作液，添加1.2ml无水乙醇到5mg TPEN。混匀，室温保存。

图1.Jurkat细胞系中Leadmium Green AM 的背景荧光。盐水中的细胞加载Leadmium Green AM 并洗涤。用488nm激发和525/10nm带通滤光片收集单色荧光。由于细胞中不存在细胞内铅或镉，因此该图表示Leadmium Green AM 提供的背景荧光。

图2.Jurkat细胞系中含有PbCl2的Jurkat细胞的荧光。盐水中的细胞上样Leadmium Green AM 并洗涤，然后在1μM PbCl 2盐水和1μM离粒霉素存在下孵育。使用488nm激发和525/10 nm带通滤光片收集单色荧光。直方图显示细胞内铅阳性。

生活，如若怀着一颗素雅的心去欣赏的，便会收获意想不到的美丽。学会淡然，便会淡看荣辱得失，不以物喜，不以己悲，让平淡的日子活出精彩；学会释然，适时清扫心灵污垢，便会让脚步轻盈，心在路上，永远不会疲惫；学会悠然，便会闲看庭前花开花落，淡看天边云卷云舒，盈一份洒脱，享受诗意人生。 ​​​​