DND-26,溶酶体绿色荧光探针(LysoTracker Green DND-26)为绿色荧光标记的溶酶体探针,可对活细胞中的酸性隔室进行染色,并已被证明可选择性地积聚在肺泡 II 型 (AT2) 细胞的层状体中.具有504/511nm的最大激发/发射波长。
LysoTracker系列探针是对活细胞中的酸性区室进行选择性染色的一类荧光染料,该类探针具有几大重要的特点:
选择性标记酸性细胞器;
纳摩尔级(nM)浓度即可有效标记活细胞;
具有多色探针提供,可根据情况对样品进行多标实验。
LysoTracker Green DND-26的使用方法
使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。
1.工作液的配制
利用培养基或合适的缓冲液将1mM 储存液稀释至工作浓度,推荐工作液浓度为50-75nM;
【注意】:为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。
2.染色
2 .1 对于贴壁细胞1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min~2h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30min~2h(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或加长染色时间。
【注意】:对于悬浮细胞,也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上,然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
LysoTracker系列探针是对活细胞中的酸性区室进行选择性染色的一类荧光染料,该类探针具有几大重要的特点:
选择性标记酸性细胞器;
纳摩尔级(nM)浓度即可有效标记活细胞;
具有多色探针提供,可根据情况对样品进行多标实验。
LysoTracker Green DND-26的使用方法
使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。
1.工作液的配制
利用培养基或合适的缓冲液将1mM 储存液稀释至工作浓度,推荐工作液浓度为50-75nM;
【注意】:为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。
2.染色
2 .1 对于贴壁细胞1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min~2h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30min~2h(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或加长染色时间。
【注意】:对于悬浮细胞,也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上,然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
【“以图查房”上线,二手房购房者可自助做“背调”】
11月1日,上海市规划和自然资源局透露,即日起,市民足不出户,就可在市政府“一网通办”平台上,使用“以图查房”便民功能来查询不动产登记信息了。新功能将更方便购房者进行产权调查,避免不必要的麻烦和损失。
市民如果要购买房产,又担心心仪的房产产权存在瑕疵,就可以注册登录一网通办。在网站上,可以查询相关房产的系列信息,主要是产权是否存在瑕疵等。
“以图查房”的上线,给二手房购房者提供了便利、加载了安全、节省了时间。
首先,“一房多卖”的防不胜防,概率大大降低。
特别是首次购房者,因为对交易流程不熟悉,往往成为“一房多卖”的重灾区。究其原因,可能是对于相关权证不熟悉,甚至“拿在手里也不知道重要条款看哪几项”,所以往往在一到两次沟通中,被极少数房东和中介看穿,从而成为“被欺凌”交易对象。
其次,便利购房者的三重价值。
包括一键查询的房源信息真实性和“单身性”,不仅从安全属性上解决了购房者的后顾之忧,而且从节约往返、到窗口拉征信和咨询等时间成本上,也解决了购房者“平时没空去&周末政务部门休息”之间的失之交臂。
第三,信息进一步透明,也倒逼中介交易的规范化和标准化。
之前用道德教育来提升行业不规范行为的做法,事实上是事倍功半的,而采用了“一键到达”的线上手段辅佐之后,购房者无需担心中介和房东的诚信问题,因为房源上线所以明码(身份)标签,少了沟通迂回和解释,间接协同行业和交易的规范。
据悉,目前可以查询的信息包括不动产的自然状况,是否存在共有情形,是否存在抵押登记、预告登记、异议登记或者查封登记情形。根据国家和本市不动产登记资料查询相关规定,还可以查询到房屋用途类型为非住宅,且权利人为法人或非法人组织的不动产权利人信息及相关宗地图、房屋平面图等。
11月1日,上海市规划和自然资源局透露,即日起,市民足不出户,就可在市政府“一网通办”平台上,使用“以图查房”便民功能来查询不动产登记信息了。新功能将更方便购房者进行产权调查,避免不必要的麻烦和损失。
市民如果要购买房产,又担心心仪的房产产权存在瑕疵,就可以注册登录一网通办。在网站上,可以查询相关房产的系列信息,主要是产权是否存在瑕疵等。
“以图查房”的上线,给二手房购房者提供了便利、加载了安全、节省了时间。
首先,“一房多卖”的防不胜防,概率大大降低。
特别是首次购房者,因为对交易流程不熟悉,往往成为“一房多卖”的重灾区。究其原因,可能是对于相关权证不熟悉,甚至“拿在手里也不知道重要条款看哪几项”,所以往往在一到两次沟通中,被极少数房东和中介看穿,从而成为“被欺凌”交易对象。
其次,便利购房者的三重价值。
包括一键查询的房源信息真实性和“单身性”,不仅从安全属性上解决了购房者的后顾之忧,而且从节约往返、到窗口拉征信和咨询等时间成本上,也解决了购房者“平时没空去&周末政务部门休息”之间的失之交臂。
第三,信息进一步透明,也倒逼中介交易的规范化和标准化。
之前用道德教育来提升行业不规范行为的做法,事实上是事倍功半的,而采用了“一键到达”的线上手段辅佐之后,购房者无需担心中介和房东的诚信问题,因为房源上线所以明码(身份)标签,少了沟通迂回和解释,间接协同行业和交易的规范。
据悉,目前可以查询的信息包括不动产的自然状况,是否存在共有情形,是否存在抵押登记、预告登记、异议登记或者查封登记情形。根据国家和本市不动产登记资料查询相关规定,还可以查询到房屋用途类型为非住宅,且权利人为法人或非法人组织的不动产权利人信息及相关宗地图、房屋平面图等。
【SE新作《HARVESTELLA》获Fami通31分评价】SE种地模拟新作《HARVESTELLA》即将于11月4日发售,Fami通在最新一期杂志中为本作打出了31分的评价(8/8/8/7,满分40),以下为点评要点:
1.游戏中种田要素十分丰富,可以让人享受其中并获得很大的满足感。
2.战斗上比预想中的要简单易上手,不过要是能再加个回避动作就好了。
3.随着游戏的进程可做的事情会变得会越来越多,不会感到无聊。
4.一些极端的限制让人有点压力,如:空腹状态下无法恢复HP,无法攻击和冲刺等。
5.冗余的推进节奏和加载频繁等问题有点影响游戏体验。
6.总的来说,想要感到游戏的乐趣可能需要花上一些时间,不过一旦体会到就很容易沉迷进去。
1.游戏中种田要素十分丰富,可以让人享受其中并获得很大的满足感。
2.战斗上比预想中的要简单易上手,不过要是能再加个回避动作就好了。
3.随着游戏的进程可做的事情会变得会越来越多,不会感到无聊。
4.一些极端的限制让人有点压力,如:空腹状态下无法恢复HP,无法攻击和冲刺等。
5.冗余的推进节奏和加载频繁等问题有点影响游戏体验。
6.总的来说,想要感到游戏的乐趣可能需要花上一些时间,不过一旦体会到就很容易沉迷进去。
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